30초 요약: 이 글의 요점
- “무혈청”과 “제노프리”는 서로 다른 축입니다. “무혈청인데 소 유래 성분이 들어 있는” 배지도, 그 반대도 실재합니다.
- “넣지 않는다”는 표시는 안전의 보증이 아닙니다. 제노프리라도 인간 혈청 등은 허용되므로, 인간 유래 병원체 위험은 남습니다.
- 정의는 제조사마다 엇갈립니다. 비교의 판단 근거는 구분 명칭이 아니라, 원재료 목록을 어디까지 거슬러 올라갈 수 있는가입니다.
1. 네 가지 구분은 각각 “무엇을 넣지 않는가”의 선언
결론부터 말하면, 네 가지 구분은 모두 “이 종류의 성분은 넣지 않았다”는 선언이며 제한하는 대상이 각각 다릅니다. 먼저 정의를 나열합니다.
| 구분 | 포함하지 않는 것 | 포함해도 되는 것 |
|---|---|---|
| 무혈청 (serum-free) | 혈청 · 혈장 그 자체 | 혈청 이외의 동물 유래 · 인간 유래 성분(알부민, 성장인자, 호르몬 등) |
| 제노프리 (xeno-free) | 인간 이외의 동물에서 유래한 성분 | 인간 유래 성분(인간 혈청 알부민, 인간 혈소판 용해물 등), 재조합 단백질 |
| 동물성분 불포함 (ACF / AOF) | 인간을 포함한 동물의 조직 · 체액에서 직접 유래한 원재료 | 재조합 단백질(다만 제조 공정은 별도로 확인이 필요) |
| 화학적 조성 규명 (chemically defined) | 조성이 밝혀지지 않은 성분(혈청 · 가수분해물 · 조직 추출물) | 구조와 농도가 밝혀진 성분. 고도로 정제된 재조합 단백질을 포함 |
무단백은 또 다른 축으로, 단백질 · 폴리펩타이드를 성분으로 포함하지 않는 것을 가리킵니다. 유리 아미노산이나 식물 · 효모 유래 가수분해물은 포함할 수 있다고 봅니다.
2. “무혈청＝제노프리”가 아니다 — 답하고 있는 질문이 다르다
실무에서 가장 많이 오해하는 지점입니다. 이 둘은 포함 관계에 있지 않습니다. 나누는 축이 다르기 때문입니다.
핵심 포인트
식품 표시의 “국산”과 “무첨가”의 관계와 비슷합니다. “국산”은 산지에 대한 질문에, “무첨가”는 내용물에 대한 질문에 답하고 있어서, 국산이면서 첨가물이 든 식품도, 수입산이면서 무첨가인 식품도 있습니다. 마찬가지로 “무혈청”은 혈청이라는 재료에 관한 이야기이고, “제노프리”는 유래한 생물에 관한 이야기입니다. 한쪽 표시에서 다른 쪽을 추측할 수는 없습니다.
실제로 한쪽만 충족하는 배지가 양쪽 방향으로 존재합니다.
- 무혈청이지만 제노프리는 아니다. 혈청을 뺀 대신 소혈청 알부민(BSA)이나 소 유래 조단백 분획을 첨가하는 설계가 여기에 해당합니다
- 제노프리이지만 무혈청은 아니다. 인간 혈청이나 인간 혈소판 용해물을 첨가한 배지는 인간 이외의 동물 성분을 포함하지 않으므로 제노프리에 해당할 수 있는 한편, 혈청 유래 성분을 쓴다는 점에서 무혈청은 아닙니다
따라서 “무혈청이라고 적혀 있으니 소 유래 성분은 들어 있지 않다”고 말할 수 없습니다. 반대로 “제노프리이니 혈청은 쓰지 않았다”고도 말할 수 없습니다.
3. “넣지 않는다”는 것은 안전의 보증이 아니다
오해를 부르기 쉬우므로 분명히 적습니다. 무혈청도 제노프리도, 그 자체로는 안전성의 보증이 아닙니다. 이 표시들은 “쓰지 않은 것”의 목록이지, “남아 있는 위험”의 목록이 아니기 때문입니다.
무혈청이라도 소혈청 알부민 등 소 유래 성분을 포함할 수 있습니다. 제노프리는 인간 유래 성분을 허용하므로, 인간 병원체에 관한 위험은 남습니다. 실제로 인간 혈소판 용해물에 대해서는 E형 간염 바이러스와 파보바이러스 B19의 전파가 논점이 되고 있습니다.
안전성은 “무엇을 뺐는가”가 아니라 원재료별로 개별적으로 평가되는 것입니다. 구분의 명칭은 확인의 출발점은 될 수 있어도 결론은 되지 못합니다.
4. 정의 자체가 제조사마다 다르다
더 까다로운 점이 있습니다. 이 용어들에는 통일된 국제 정의가 없습니다. 같은 구분 명칭이라도 제조사가 다르면 가리키는 범위가 다릅니다.
예를 들어 “동물성분 불포함”에 대해, 어떤 제조사는 “동물 · 인간 유래 성분을 배제”로 정의하고, 다른 제조사는 “동물 세포주로 만든 재조합 단백질은 포함할 수 있다”고 봅니다. 무단백의 범위도 공급처에 따라 다릅니다.
원재료에는 “원재료의 또 그 원재료”가 있다는 점도 놓칠 수 없습니다. 빵의 표시에 “밀가루”라고 적혀 있어도 그 밀가루가 어떻게 만들어졌는지까지는 적혀 있지 않은 것과 같은 구도입니다. 실제로 “동물 유래 원료 불포함”을 내세우는 경우에도, 1차 · 2차 원재료가 동물 유래가 아닐 것을 요구하는 한편 3차 원료까지는 동물 조직 유래일 수 있다고 명시한 예가 있습니다. 재조합 단백질이라 하더라도 발현이나 정제 공정에서 동물 유래 원료가 쓰일 여지는 남습니다.
표시만으로는 무엇이 배제되어 있는지 판단할 수 없습니다. 비교 검토 시에는 라벨의 구분 명칭이 아니라 원재료 목록을 가능한 한 거슬러 올라가 확인하실 것을 권합니다. “그 성분은 어디에서 유래했는가”를 한 단계씩 물어보는 것이 확실합니다.
확인은 다음 순서로 진행하면 확실합니다.
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구분 명칭이 아니라 원재료 목록을 받아 본다
“○○ 프리”의 정의는 제조사마다 엇갈리므로, 구분 명칭만으로는 무엇이 배제되어 있는지 특정할 수 없습니다.
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각 성분의 “유래”를 한 단계씩 거슬러 올라가 묻는다
재조합 단백질이라 하더라도 발현이나 정제 공정에서 동물 유래 원료가 쓰일 여지가 있습니다. 3차 원료까지 확인할 수 있는 것이 이상적입니다.
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인간 유래 성분이 남는다면 그 평가 방법을 확인한다
제노프리는 인간 혈청이나 인간 혈소판 용해물을 허용합니다. 인간 병원체에 관한 위험을 어떻게 평가하고 있는지는 별도의 확인 사항입니다.
5. 혈청을 빼면 배양은 어떻게 되는가
결론부터 말하면, 영향은 배지의 설계에 따라 달라지며 일률적으로 “느려진다”고 할 수는 없습니다. 단순히 혈청을 빼면 접착성이나 증식은 떨어집니다. 혈청에 증식인자와 접착인자가 들어 있기 때문입니다.
다만 “무혈청으로 하면 반드시 증식이 느려진다”고는 말할 수 없습니다. 최적화된 무혈청 · 제노프리 배지에서는 소태아혈청을 쓴 경우보다 배가 시간(세포 수가 두 배가 되기까지의 시간)이 짧았다는 보고가 있습니다. 세포의 종류와 배지의 설계에 크게 좌우되기 때문입니다.
즉 혈청을 빼는 것 자체가 목적이 아니라, 뺀 상태에서 배양이 성립하는 설계인지가 관건입니다.
6. 일본 국내 가이던스는 어떻게 기술하고 있는가
일본 국내 지침도 이 문제를 명확히 다루고 있습니다. 일본재생의료학회의 가이던스는 세포외소포 등의 조제에 있어 동물 유래 성분을 포함하지 않는 제노프리 배지를 사용해야 한다고 기술하고 있습니다[1].
이유도 구체적입니다. 소태아혈청을 사용한 경우에는 소혈청 유래 세포외소포가 혼입되어 예기치 않은 생물 활성을 나타낼 우려가 있다고 지적되어 있습니다. 우려되는 물질로 알부민, 피브리노겐, 피브로넥틴, 아포B, 마크로글로불린, 헤모글로빈, 혈액응고인자 등이 구체적으로 열거되어 있습니다.
당사의 설계 — “나중에 제거하는” 것이 아니라, 처음부터 넣지 않는다
당사는 타동물 유래 원료 프리 · 무혈청 · 무단백 배지를 처음부터 개발하고 있습니다. 회수용 배양액은 배지 유래 단백질을 포함하지 않습니다.
이는 “나중에 제거하는” 공정을 두지 않는 설계입니다. 성능을 주장하는 것은 아닙니다. 제품에 포함되는 성분의 출처를, 세포가 분비한 것으로만 한정하기 위한 설계입니다.
핵심 포인트
방 안에 모래를 들이지 않으면 청소 솜씨를 따질 필요가 없습니다. 마찬가지로 처음부터 넣지 않는 설계에서는 “얼마나 제거했는가(제거율)”라는 논점 자체가 생기지 않습니다. “나중에 제거하는” 제조법과의 차이는 이 논점의 유무에 있습니다.
“나중에 제거하는” 경우에 무엇이 남는지는 소혈청 유래 RNA는 “나중에 제거”로 다 없앨 수 없다에, 제조법 3단계의 비교는 줄기세포 배양상청액과 분비단백체의 차이에 정리해 두었습니다.
자주 묻는 질문
“무혈청”이라고 적혀 있으면 소 유래 성분은 들어 있지 않은 것입니까.
반드시 그렇지는 않습니다. 무혈청은 “혈청 · 혈장 그 자체를 포함하지 않는다”는 뜻이며, 혈청 이외의 동물 유래 성분은 허용됩니다. 혈청을 뺀 대신 소혈청 알부민 등을 첨가하는 설계가 실재합니다. 소 유래 성분의 유무를 확인하고자 하신다면 제노프리인지 여부를 별도로 문의해 주십시오.
제노프리이면 안전하다는 뜻입니까.
안전성의 보증은 아닙니다. 제노프리는 인간 이외의 동물 유래 성분을 포함하지 않는다는 뜻이며, 인간 혈청이나 인간 혈소판 용해물은 허용됩니다. 따라서 인간 병원체에 관한 위험은 남습니다. 안전성은 “무엇을 뺐는가”가 아니라 원재료별로 개별적으로 평가되는 것입니다.
이 용어들에 통일된 정의가 있습니까.
없습니다. 제조사나 문헌에 따라 정의가 엇갈립니다. 예를 들어 동물성분 불포함에 대해, 인간 유래 성분까지 배제한다고 보는 정의가 있는가 하면, 동물 세포주로 만든 재조합 단백질은 포함할 수 있다고 보는 정의도 있습니다. 표시된 구분 명칭이 아니라 원재료 목록을 거슬러 올라가 확인하시기를 권합니다.
참고문헌
- [1] 일본재생의료학회(협력: 일본세포외소포학회) 「세포외소포 등의 임상응용에 관한 가이던스(제1판)」 2024년 4월 30일
본 글은 배지의 구분과 제조상의 설계에 대해 설명한 것입니다. 당사의 줄기세포 분비단백체(세포가 배양 중에 분비한 성분의 총체)는 연구용 시약으로 공급하고 있으며, 특정 질환에 대한 효과를 나타내는 것이 아닙니다.