30초 요약: 이 글의 요점
- ‘분비단백체’에 공적인 정의는 없습니다. 공급처마다 뜻하는 바가 다르기 때문에, 구매하는 쪽이 스스로 잣대를 가지고 확인할 필요가 있습니다.
- 세 용어는 마트료시카 같은 포함 관계입니다. 가장 바깥이 줄기세포 배양상청액, 그 안쪽이 ‘세포의 분비 성분만’인 분비단백체이며, 엑소좀은 다시 그 안쪽에 있는 성분의 하나입니다.
- 정의는 선언이 아니라 시험성적서로 확인합니다. 당사는 ‘분비 성분만으로 구성’, ‘소혈청 불사용’ 등 6가지 조건을 부과하고, 그 결과를 제조 단위(로트)별 시험성적서로 공개하고 있습니다.
1. 먼저 결론 — 세 용어는 ‘포함’ 관계
‘줄기세포 배양상청액’, ‘분비단백체’, ‘엑소좀’. 이 세 가지는 나란히 놓고 비교할 수 있는 것이 아니라, 마트료시카처럼 겹겹이 포개진 포함 관계에 있습니다. 먼저 이 위치 관계를 한 장의 그림으로 잡아 두십시오.
가장 바깥쪽의 줄기세포 배양상청액은 줄기세포를 배양한 뒤의 액에 들어 있는 것 전부를 가리킵니다. 세포가 분비한 성분에 더해 배지 유래 성분, 소혈청 등 동물 유래 성분, 배양을 위해 첨가한 인자, 배양 중에 생긴 세포 파편이나 암모니아가 함께 들어 있는 경우가 있습니다.
그 안쪽에 있는 분비단백체는 이 가운데 세포가 분비한 성분만으로 구성된 것을 가리킵니다. 즉 ‘배양상청액인가 분비단백체인가’는 서로 다른 것끼리의 비교가 아니라, 바깥 테두리의 어디까지를 제품에 포함할 것인가 하는 선 긋기의 문제입니다.
가장 안쪽의 엑소좀은 분비단백체에 포함되는 막소포(세포외소포)의 한 종류입니다(자세한 내용은 엑소좀이란 무엇인가). 분비단백체와 나란히 놓이는 별개의 것이 아닙니다. 엑소좀 제제란 분비단백체에서 막소포만을 분리해 낸 것으로, 분리하는 공정에서 사이토카인(세포 사이의 정보 전달을 담당하는 단백질)이나 성장인자 등의 가용성 인자는 소실됩니다(자세한 내용은 엑소좀만 분리하면 무엇이 사라지는가).
핵심 포인트
‘엑소좀인가, 분비단백체인가’라는 양자택일은 ‘가장 작은 인형인가, 마트료시카 전체인가’를 묻는 것과 같아서 비교로 성립하지 않습니다. 물어야 할 것은 우열이 아니라, 막소포만 분리해 낼 것인가, 분비 성분 전체를 남길 것인가라는 설계의 차이입니다.
2. ‘분비단백체’에 공적인 정의는 없다
여기가 출발점입니다. ‘분비단백체’라는 용어에는 공적인 정의도 업계 표준도 없습니다. 약기법상의 구분도 아니고, 학회가 정한 기준도 아닙니다.
그래서 공급처마다 설명이 어긋납니다. 배양상청액과 거의 같은 뜻으로 쓰는 예도 있고, 농축의 정도를 가리켜 쓰는 예도 있어 어느 쪽이 틀렸다고 할 수도 없습니다. 공통의 잣대 없이 길이를 논하는 것과 같아서, 용어만 맞대어서는 논의가 맞물리지 않습니다.
따라서 구매하는 쪽이 스스로 잣대를 가질 수밖에 없습니다. 다음에 제시하는 것은 당사가 자사 제품에 부과하고 있는 정의입니다. 업계의 공통 기준은 아니지만, 무엇을 확인해야 하는지에 대한 실마리는 됩니다.
3. 당사가 ‘분비단백체’라고 부르는 6가지 조건
결론부터 제시합니다. 당사는 다음 6가지를 모두 충족하는 것만을 ‘분비단백체’라고 부르고 있습니다. 번호는 식별을 위한 것으로, 순서나 우선순위를 나타내지 않습니다.
- 1
세포 또는 조직에서 분비된 성분만으로 구성된다
- 2
회수용 배지에 사이토카인이나 성장인자가 잔존하지 않는다
- 3
단백질, 펩타이드, 핵산, 엑소좀 등의 막소포를 포함한다
- 4
암모니아, 중금속 등의 유해물질, 사멸세포 등의 불순물을 포함하지 않는다
- 5
소혈청을 사용하지 않는다
- 6
성분의 근거가 있다(단백질 정량, 주요 사이토카인 측정, 엑소좀 분석 등)
핵심 포인트
실무에서 특히 크게 작용하는 것은 조건 2와 5입니다. 육수를 내기 전의 물에 처음부터 조미료가 들어 있었다면, 완성된 국물의 맛이 재료에서 나온 것인지 나중에 더한 것인지 마셔 보는 것만으로는 가려낼 수 없습니다. 마찬가지로 회수용 배지에 성장인자가 남아 있으면, 성분표의 수치가 ‘세포가 분비한 양’인지 ‘원래 배지에 들어 있던 양’인지를 구별할 수 없게 됩니다.
왜 이 6가지인가 — 성격이 다른 세 묶음
6가지 조건은 성격이 다른 세 묶음으로 정리할 수 있습니다. ‘무엇을 넣지 않을 것인가’, ‘무엇을 남길 것인가’, ‘확인할 수 있는가’의 셋입니다.
1 · 2 · 5는 ‘무엇을 넣지 않을 것인가’의 조건입니다. 제품에 포함되는 성분의 출처를 세포가 분비한 것만으로 한정하기 위한 선 긋기입니다. 이는 회수 후의 처리로는 담보할 수 없고, 배지와 배양 공정의 설계에서 결정됩니다.
3은 ‘무엇을 남길 것인가’의 조건입니다. 불순물을 줄이는 것만 좇으면 목적하는 성분까지 사라집니다. 막소포를 포함한 다양한 분비 성분을 유지한 채 불필요한 물질을 배제하는, 두 가지의 양립이 요구됩니다.
4 · 6은 ‘확인할 수 있는가’의 조건입니다. 1부터 3까지를 아무리 꼼꼼하게 설계해도, 측정해 서면으로 제시하지 못하면 구매하는 쪽에서는 확인할 방법이 없습니다. 시험성적서로 제출할 수 있는 것까지를 조건에 포함하고 있습니다.
6가지 각각을 공급처에 어떻게 확인하면 좋을지는 공급처에 확인해야 할 6가지 항목에서 설명하고 있습니다.
4. 어떻게 만드는가 — ‘나중에 제거’가 아니라 ‘처음부터 넣지 않는다’
결론부터 말하면, 6가지 조건을 충족할 수 있는지는 회수 후의 정제 기술이 아니라 애초에 불필요한 성분을 들여오지 않는 배지 · 배양 공정의 설계에서 결정됩니다. 흐린 물을 나중에 걸러 맑게 만들기보다, 처음부터 맑은 물을 쓰는 편이 확실하다는 사고방식입니다.
제법은 크게 세 가지로 나뉩니다. 아무 처리도 하지 않는 배양상청액, 회수 후에 불필요한 성분을 제거하는 배양상청액, 그리고 처음부터 넣지 않는 설계입니다. 중간의 ‘나중에 제거하는’ 방식에는 완전한 제거가 어렵다는 한계가 있습니다.
세 가지 제법의 잔류 성분 차이는 줄기세포 배양상청액과 분비단백체의 차이에서 그림으로 설명하고 있습니다.
배지의 설계
당사는 타 동물 유래 원료 무첨가 · 무혈청 · 무단백(배지에 단백질을 넣지 않는 설계)의 배지를 처음부터 자체 개발하고 있습니다. 회수용 배양액은 배지 유래 단백질을 포함하지 않습니다. 조건 2와 5는 이 배지 설계 자체로 충족됩니다.
제조 환경
클래스 10,000의 클린부스 안에 설치한 클래스100 안전작업대에서 제조하고 있습니다. 재생의료등 제품의 제조에 권장되는 환경 기준에 따른 운용입니다.
담당자
제조에 관여하는 직원은 전원 의학 · 약학 박사 학위 취득자입니다. 국립대학 등 연구기관에서 10년 이상의 연구 실적을 가진 인력이 개발 · 제조를 담당하고 있습니다.
5. 어떻게 확인하는가 — 시험성적서로 제시할 수 있는 품질기준
정의와 제법을 아무리 설명해도, 그것만으로는 확인이 되지 않습니다. 마지막에 작용하는 것은 조건 6의 ‘성분의 근거’, 즉 측정한 결과를 서면으로 제시할 수 있는가입니다. 당사가 실시하고 있는 시험은 다음과 같습니다.
| 구분 | 시험 항목 |
|---|---|
| 제제 시험 | 무균시험 / 마이코플라스마 음성시험 / 엔도톡신 시험 |
| 원료(공여자) 검사 | 인체면역결핍바이러스(1형 · 2형) / B형간염바이러스 / C형간염바이러스 / 매독 / 사람T세포림프친화바이러스(1형 · 2형) / 인간 전염성 해면상뇌증 |
| 성분 분석 | 단백질 정량 / 주요 사이토카인 측정(EGF, VEGF, TGF-α/β, IGF 등) / 엑소좀에 포함된 miRNA 분석 |
| 기타 | 제품안전보건자료(MSDS) 발행 / 첩포시험 |
생물유래 원료기준의 제조 규정에 따라 실시하고 있습니다. 시험 결과는 로트별 시험성적서(COA)로 확인하실 수 있습니다.
핵심 포인트
성분 분석에서는 목적하는 성분을 측정하는 데 그치지 않고, 염증을 일으키는 염증성 사이토카인(IL-6 · TNF-α)이 정량한계 이하임도 확인하고 있습니다. 무엇이 들어 있는가와 같은 정도로, 무엇이 들어 있지 않은가가 중요하기 때문입니다.
6. 제형과 보관 — 냉동고의 유무로 선택이 달라진다
제형은 동결건조와 액상 냉동의 두 가지가 있으며, 필요한 보관 설비가 달라집니다. 동결건조는 차광 실온(40℃까지)에서 보관할 수 있어 냉동고가 없는 시설에서도 도입할 수 있습니다. 액상 냉동은 냉동 보관(−20℃ 이하)이 필요합니다.
보관 조건과 재고 운용의 자세한 내용은 동결건조가 가능하게 하는 상온 관리에 정리해 두었습니다.
아직 밝혀지지 않은 것 — 측정할 수 있다는 것과 밝혀졌다는 것은 다르다
여기까지는 정의와 제법, 그리고 측정할 수 있는 항목에 관한 이야기입니다. 측정할 수 있다는 것과 밝혀졌다는 것은 다릅니다. 비교 검토를 하실 때는 다음 세 가지도 함께 인지해 주십시오.
- 성분 목록은 효과의 설명이 되지 않습니다. 사이토카인의 정량값은 ‘무엇이 얼마나 들어 있는가’를 나타내는 것이며, 그것이 어떻게 작용하는가를 나타내는 것이 아닙니다.
- 로트 간 변동이 0이 되지는 않습니다. 원료가 생체 유래인 이상, 완전히 동일한 조성은 재현할 수 없습니다. 그렇기 때문에 로트마다 측정하고 성적서를 첨부하고 있습니다.
- ‘분비단백체’라는 용어 자체가 아직 정립되지 않았습니다. 본 기사의 6가지 조건도 업계의 합의가 아니라 당사의 정의입니다. 몇 년 뒤에는 다른 정리 방식이 표준이 되어 있을 가능성이 있습니다.
공급처를 고르실 때는 단정적인 설명보다, 어디까지가 측정된 사실이고 어디부터가 추정인지를 구분해 이야기할 수 있는가를 보시는 편이 확실합니다.
자주 묻는 질문
분비단백체와 줄기세포 배양상청액은 부르는 이름만 다른 것입니까.
다릅니다. 줄기세포 배양상청액은 배양한 뒤의 액에 들어 있는 모든 것을 가리킵니다. 세포가 분비한 성분에 더해 배지 유래 성분, 동물 유래 성분, 배양을 위해 첨가한 인자, 세포 파편 등이 함께 들어 있는 경우가 있습니다. 분비단백체는 이 가운데 세포가 분비한 성분만으로 구성된 것을 가리킵니다. 다만 이 용어에는 공적인 정의가 없기 때문에, 같은 용어를 더 넓은 뜻으로 쓰는 예도 있습니다.
엑소좀 제제와 분비단백체 중 어느 쪽을 고르면 됩니까.
이 두 가지는 나란히 놓고 비교할 수 있는 것이 아닙니다. 엑소좀은 분비단백체에 포함되는 성분의 하나이며, 엑소좀 제제란 분비단백체에서 막소포만을 분리해 낸 것입니다. 분리하는 공정에서 사이토카인이나 성장인자 등의 가용성 인자(액에 녹은 상태로 작용하는 성분)는 소실됩니다. 무엇을 남기고자 하는지에 따라 선택이 달라집니다.
‘분비단백체’에 업계의 공통 기준이 있습니까.
없습니다. 공적인 정의도 업계 표준도 존재하지 않기 때문에 공급처마다 설명이 다릅니다. 본 기사에서 제시하고 있는 6가지 조건은 당사가 자사 제품에 부과하고 있는 정의입니다. 비교 검토의 잣대로 활용해 주십시오.
본 기사는 용어의 정의 · 제조 방법 · 품질 관리에 대해 설명한 것입니다. 당사의 줄기세포 분비단백체는 연구용 시약으로 공급하고 있으며, 특정 질환에 대한 효과를 나타내는 것이 아닙니다.