«Бессывороточная» среда — правда ли без сыворотки?
6 вопросов поставщику

Ниже шесть пунктов для проверки изложены в форме вопросов, а затем на схеме разобрано слово, которое понимают неправильно чаще всего, — «бессывороточная».

1. Почему по одному названию сравнивать нельзя

Коротко: у термина «секретом» нет официального определения. Это же слово иногда употребляют в более широком смысле, и сегодня по названию продукта или его описанию о различиях в содержимом судить нельзя.

Поэтому «секретомом» мы называем только то, что отвечает всем шести условиям ниже. Дальше каждое из них изложено в форме вопроса, который стоит задать поставщику. О самой разнице между кондиционированной средой и секретомом мы пишем в статье Чем кондиционированная среда стволовых клеток отличается от секретома.

2. Шесть пунктов для проверки у поставщика

Если коротко, эти шесть пунктов выясняют что не добавляют, что измеряют и что могут выдать в письменном виде. Для каждого указано, что уточнить и что происходит, если условие не выполнено.

1. 1Состоит только из компонентов, выделенных клетками или тканью

   Что уточнить

   Что добавляют на этапе сбора. Может ли поставщик раскрыть состав питательной среды.

   Если не выполнено

   Поставщик не сможет объяснить, чем являются цифры в данных о составе: тем, что выделили клетки, или тем, что добавили потом.

2. 2В среде для сбора не остаётся цитокинов и факторов роста

   Что уточнить

   Является ли среда для сбора безбелковой. Не добавляют ли в неё сывороточный альбумин или факторы роста.

   Если не выполнено

   Нельзя различить, откуда взялись факторы роста в продукте — из клеток или изначально из питательной среды. Это как с супом: непонятно, даёт вкус бульон из самих продуктов или приправа, добавленная в самом начале, — и смысл цифр становится неопределённым.

3. 3Содержит белки, пептиды, нуклеиновые кислоты и мембранные везикулы, в том числе экзосомы

   Что уточнить

   Есть ли данные анализа экзосом (размер и число частиц) и количественного определения белка.

   Если не выполнено

   Остаётся вероятность, что при удалении примесей вместе с ними ушли и нужные компоненты. «Чистота» и «наличие» — разные утверждения, и каждое требует отдельного подтверждения.

4. 4Не содержит вредных веществ — аммиака, тяжёлых металлов — и примесей вроде погибших клеток

   Что уточнить

   Выдаются ли протоколы испытания на стерильность, теста на микоплазму и теста на эндотоксин на каждую партию. Показывают ли результаты ниже предела обнаружения в числах.

   Если не выполнено

   Содержимое колеблется от партии (объём, произведённый за один раз в одинаковых условиях) к партии. При одном и том же названии каждая поставка может оказаться другой.

5. 5Без бычьей сыворотки (FBS)

   Что уточнить

   До какого этапа сыворотка не используется. Не используется ли она на всём пути от наращивания культуры до сбора.

   Если не выполнено

   Разговор сводится к степени удаления, и ответить «не используем» уже нельзя. Подробнее — в следующем разделе.

6. 6Состав подтверждён данными

   Что уточнить

   Могут ли предоставить результаты количественного определения белка, измерения основных цитокинов и анализа экзосом. Приходят ли они, если действительно их запросить.

   Если не выполнено

   Нет мерила для сравнения с другими поставщиками. Проверить, верны ли ответы по пунктам с 1 по 5, тоже не получится.

3. Каких этапов касается слово «бессывороточная»

Из шести пунктов по одним формулировкам труднее всего судить о пятом. Коротко: за одним и тем же словом «бессывороточная» могут стоять два разных процесса.

Есть такой порядок работы: для наращивания культуры (этап, на котором клетки размножают до нужного количества) берут среду с сывороткой, затем клетки отмывают и только на время сбора переходят на бессывороточную среду. И в этом случае в описании продукта можно написать «бессывороточная».

Поэтому спрашивать стоит не «бессывороточная ли она», а «до какого этапа сыворотка не используется». Если её не используют на всём пути от наращивания культуры до сбора, поставщик может ответить «не используем», не переходя к разговору о степени удаления.

4. С чего начать проверку

Если задать все шесть вопросов сразу сложно, рекомендуем начать с шестого пункта — «состав подтверждён данными». Сертификат анализа на партию и данные о составе — это, по сути, результаты медосмотра продукта. Без них о состоянии судить попросту нечем.

Достаточно действительно их запросить — уже это скажет о многом. Быстро ли их присылают. Относятся ли они к конкретной партии или это типовые значения для продукта. Что входит в перечень измерений. В конечном счёте здесь и сходится вопрос о том, можно ли проверить ответы по пунктам с 1 по 5.

Часто задаваемые вопросы

Если указано «бессывороточная», этого достаточно?

По одной этой формулировке судить нельзя. Наращивание культуры может идти на среде с сывороткой, а после отмывки на бессывороточную среду переходят только для сбора — и тот и другой порядок работы можно назвать «бессывороточным». Уточняйте, до какого этапа сыворотка не используется.

Какой из шести пунктов проверять первым?

Рекомендуем начать с шестого — «состав подтверждён данными». Если действительно запросить сертификат анализа на партию и данные о составе, станет видно, может ли поставщик отвечать на остальные пункты документально.

Эти шесть пунктов — общепринятый отраслевой стандарт?

Нет. Это определение, которое мы предъявляем к собственной продукции. У термина «секретом» нет официального определения, и некоторые используют это слово в более широком смысле. Используйте эти пункты как мерило для сравнения.

По каждому из этих шести пунктов мы отвечаем в письменном виде. Запросить сертификаты анализа и данные о составе можно через форму обратной связи.

Спецификация секретома стволовых клеток → Система контроля качества →