30秒でわかる、この記事の要点
- 定義が定まっていない語があります。「セクレトーム」には公的な定義も業界標準もなく、同じ語でも供給元ごとに指すものが違います。
- 数値には測定法がついて回ります。粒子数も純度も、どの方法で測ったかを抜きにして比べることはできません。
- 各用語から詳しい記事へ辿れます。定義の下のリンクから、その語を数値と出典つきで扱った記事に進めます。
幹細胞培養上清液conditioned medium
幹細胞を培養したあと、細胞を取り除いて残る液の全体です。細胞が分泌した成分に加えて、培地由来の成分や動物由来血清、添加因子も含まれます。エクソソームそのものではなく、それを含みうる液の全体を指します。
セクレトームsecretome
細胞が培養中に分泌した成分の総体を指す言葉です。公的な定義も業界標準もないため、同じ語でも指すものが供給元ごとに違います。当社は不要成分を最初から混ぜない設計であることなど6つの条件を課しています。
エクソソームexosome
細胞から出る直径およそ40〜160nm（平均約100nm）の膜の袋です。細胞膜が2回内側へ入り込んでできる経路（エンドソーム由来）で放出されたものだけを指し、大きさではなく由来する経路で他の細胞外小胞と区別されます。
細胞外小胞extracellular vesicle / EV
細胞から出る、脂質二重膜に包まれ自己複製しない粒子の総称です。国際指針MISEV2023は、由来を実証できない限り「エクソソーム」ではなくこの総称、または大きさによる小型EV／大型EVを使うよう推奨しています。
管腔内小胞intraluminal vesicle / ILV
多胞体の内部にできる小さな小胞です。多胞体が細胞膜と融合すると、この小胞がそのまま細胞外へ出てエクソソームになります。多胞体が800〜2000nmなのに対し、その1/10〜1/20の大きさです。
テトラスパニンCD9・CD63・CD81
細胞外小胞の表面にある膜タンパク質で、「エクソソームマーカー」と呼ばれます。ただし1個ずつ数えると半分以上の粒子がどれも持っておらず、存在の目印にはなっても質の指標にはなりません。
NTAナノ粒子トラッキング解析
光を当てて粒子のブラウン運動を追い、1つずつ数える測定法です。膜を持つ小胞とタンパク質の凝集体を区別できないため数えすぎが起き、検出下限（およそ50〜70nm）より小さい小胞は数え落とします。
粒子数濃度particle concentration
1mLあたりに含まれる粒子の個数です。MISEV2023は、手法が細胞外小胞に高い特異性を持つのでない限り「細胞外小胞の濃度」ではなく「粒子の濃度」と記述すべきだとしています。測定法が違えば報告値は6桁ずれます。
総タンパク濃度total protein
検体1mLあたりのタンパク質の総量（mg/mL）です。ロット別の品質成績書に記載されることが多く、価格を比較するときの分母として実務上もっとも揃えやすい数値です。ただし血清やアルブミンを使う製品では、それらに支配されます。
COA品質成績書 / Certificate of Analysis
そのロットを実際に試験した結果を記した文書です。供給元の品質部門が各ロットについて発行します。製品共通のカタログ値ではなく、ロットごとに発行されるかどうかが確認の要点になります。
無菌試験sterility test
製剤に生きて増える細菌・真菌がいないことを確かめる試験です。ただし細胞壁を持たないマイコプラズマや、すでに死んだ菌が残したエンドトキシンは、この試験では捉えられません。
マイコプラズマmycoplasma
細胞壁を持たない非常に小さな細菌で、通常の無菌試験の網の目をすり抜けます。培養細胞に混入しても濁りが出ないため、専用の否定試験が別に必要になります。
エンドトキシンendotoxin
グラム陰性菌の外膜に由来する発熱性物質です。菌が死んだあとも残るため、無菌試験に適合していても存在しうる点が要点です。当社は全ロットで 0.1 EU/mL 未満を確認しています。
ゼノフリーxeno-free
ヒト以外の動物に由来する成分を使わない設計を指します。「無血清」とは別の軸で、血清を抜いてもウシ血清アルブミンなど動物由来成分が入っていれば、無血清ではあってもゼノフリーではありません。
無血清serum-free
培地に血清そのものを加えない設計です。ただし拡大培養では血清を使い、回収のときだけ無血清培地に切り替える製法もあるため、どの工程が無血清なのかを確認する必要があります。
フリーズドライ凍結乾燥 / lyophilization
凍らせた水を液体に戻さず、直接水蒸気にして抜く乾燥法です。飛んでいくのは水だけなので、もとの液体が薄ければ乾燥後に残る成分も少なくなります。
賦形剤excipient
凍結乾燥で崩れない形のかたまりを作るために加える成分です。マンニトールやトレハロースなどが使われ、固形分の少ない液ほど多く加えられます。粉の量だけでは中身の量を判断できない理由のひとつです。
再生医療等安全性確保法平成25年法律第85号
再生医療等の提供を規律する法律です。細胞加工物を用いるかどうかで対象が決まり、細胞が含まれないことが明らかな培養上清液は対象外と整理されています。第1種・第2種・第3種の区分は選ぶものではなく、省令の類型への当てはめで決まります。
β-NMNベータ体のニコチンアミドモノヌクレオチド
体内でNAD⁺の材料になる物質のうち、自然界にある立体構造（β体）のものです。分子式はα体と同じため、純度の数値や不純物リストだけではα体の混入は分かりません。
用語の全体像から読みたい場合はセクレトームとは何か、比較検討の進め方は供給元に確認すべき6項目から始めるのが分かりやすい構成にしています。記事の一覧は技術資料にまとめています。
本用語集は、当社の技術資料で用いている語の定義を整理したものです。当社の幹細胞セクレトーム（細胞が培養中に分泌した成分の総体）は研究用試薬として供給しており、特定の疾患に対する効果を示すものではありません。